马荣真点点头,没再说话,但嘴角似乎动了动。
两小时到了。陈航小心地将反应管从低温浴槽取出,溶液仍呈橙黄色,没有明显变化。
“现在淬灭反应。”卢俊嘉恢复教学状态,“把反应液倒入冰浴冷却的饱和氯化铵溶液中,要慢,边倒边搅拌。”
陈航照做。反应液与氯化铵溶液接触时发出轻微的“嘶嘶”声,冒出细小气泡。
“中和放热,冰浴能控制温度。”卢俊嘉说,“等不再冒气泡,说明酸基本中和完了。现在用乙酸乙酯萃取,知道为什么用乙酸乙酯吗?”
“乙酸乙酯对中等极性有机物溶解性好,与水不混溶,沸点适中便于后续旋蒸除去。”陈航一边将混合物转移进分液漏斗一边回答。
“正确。加20毫升,盖上塞子,倒置,缓慢摇晃……对,然后小心放气。”卢俊嘉指导着每个细节,“萃取三次,合并有机相。”
三次萃取后,陈航将合并的有机相倒入锥形瓶,加入无水硫酸钠干燥。
“硫酸钠用量要合适,太少干燥不彻底,太多吸附产物。”卢俊嘉说,“加一小勺,摇晃,如果硫酸钠结块说明还有水分,再加一点。”
陈航加入硫酸钠,摇晃后颗粒自由流动,没有结块。
“干燥完成。现在过滤,旋蒸除去溶剂。”卢俊嘉递过折叠好的滤纸和漏斗。
过滤,转移至圆底烧瓶,连接旋转蒸发仪。陈航设定水浴温度40°C,缓慢抽真空。溶剂在旋转的烧瓶内壁形成均匀液膜,迅速蒸发。
五分钟后,烧瓶底部留下约0.08克浅黄色油状物。
“粗产物。”卢俊嘉说,“现在柱层析纯化。柱子我已经装好了,200-300目硅胶,直径2厘米,高30厘米。你先检查装填是否均匀。”
陈航用手电筒从侧面照射色谱柱,硅胶填充均匀,没有断层或气泡。
“上样。用最少量的二氯甲烷溶解粗产物。”卢俊嘉递过一个小样品瓶,“溶解后,用滴管转移到柱子顶端,要慢,让样品在硅胶表面形成整齐的带。”
陈航的操作虽不熟练但很仔细,淡黄色样品溶液在硅胶顶端形成了一个宽约1.5厘米的整齐色带。
“好,现在洗脱。”卢俊嘉说,“先用纯石油醚冲一段,把极性最小的杂质洗下来。流速控制在每秒一滴左右。”
清澈的石油醚缓缓流下。十分钟后,柱子顶端出现了一条淡黄色的色带,缓慢向下移动。
“这是第一个组分,可能是原料或者极性很小的杂质。”卢俊嘉讲解道,“继续洗脱,等这个带出来,我们开始梯度增加乙酸乙酯比例。”
第一个色带完全洗脱后,陈航按卢俊嘉指导,将洗脱剂改为石油醚:乙酸乙酯=95:5。
“看,新的色带出现了,颜色更深,移动更慢。”卢俊嘉指着柱子,“这应该是目标产物,N-硝基-2-氨基吡啶极性比原料大,会在较高极性段洗脱。”
陈航小心收集每一管洗脱液,同时点TLC监测。当乙酸乙酯比例增加到15%时,TLC板上出现了一个新的斑点,Rf值约0.3。
“目标馏分,第10到14管。”陈航将这几管合并,再次旋蒸。
得到约0.04克浅黄色固体。
“产率约40%。”陈航计算道,“第一次尝试,这个产率可以接受。”
他将产物分装到两个样品瓶中:“一瓶送核磁,一瓶送质谱。”
喜欢全能学霸人生请大家收藏:(m.38xs.com)全能学霸人生三八小说更新速度全网最快。